CSCO肿瘤标志物专家委员会讨论了肺癌中ALK、ROS1检测的标本条件及与其他分子标志物分析的关系，做出以下推荐或建议。

1．晚期非小细胞肺癌患者治疗前推荐常规检测ALK融合变异和ROS1融合变异状态。推荐所有含腺癌成分的非小细胞肺癌患者，应在诊断时常规进行ALK、ROS1融合基因或融合蛋白检测(1类推荐；证据级别定义请见文章末注解)。

2．对于小活检标本或者不吸烟的鳞状细胞癌患者也建议进行ALK、ROS1检测(1类推荐)。

3．检测前应有送检样本的质控，包括亚型确认和样本量确认。送检样本类型包括手术样本、活检组织样本、胸水等细胞学样本。对于部分活检组织标本因临床取材样本小的局限性，有时无法保证肺腺癌的准确诊断，应考虑对不能判断组织学类型的肺癌也进行ALK、ROS1检测(1类推荐)。

4．目前非小细胞肺癌中需要检测靶点越来越多，为了提高检测的有效性，同时兼顾技术的可行性，专家组推荐，关于ROS1的检测，推荐ROS1和ALK，EGFR同时检测(2A类推荐)。推荐使用经过认证的多靶点检测技术，同时检测ALK、EGFR和ROS1。对于不具备同时检测条件的医院，实验室可先进行ALK/ROS1的免疫组织化学方法检测。Ventana IHC检测ALK阳性可作为确认的结果,作为临床决策参考。鉴于目前ROS1抗体的非特异性，ROS1免疫组织化学方法检测结果阳性的患者，必须进一步使用FISH或者RT-PCR确诊。

5．为了避免样本浪费和节约检测时间，对于晚期非小细胞肺癌活检样本，建议一次性切出需要诊断组织类型和进行ALK、EGFR及ROS1检测的样本量，避免重复切片浪费样本(2A类推荐)。一次性制片和留取样本时需注意避免污染。

6．有研究表明，发病年龄是ALK阳性非小细胞肺癌一项显著的独立预测因子，在年轻非小细胞肺癌患者中，发生ALK融合的概率显著高于发生EGFR突变的概率，在年龄小于51岁的患者中，发生ALK重排的概率高达18.5%。因此对于样本量有限可能不能满足同时进行ALK和EGFR检测的样本，对于年龄相对比较年轻的患者，建议考虑优先检测ALK融合状态(2B类推荐)。

1．对于ALK阳性非小细胞肺癌的诊断，肿瘤原发或转移部位的组织或细胞学标本均可进行ALK融合基因检测，推荐使用CFDA批准的诊断试剂和方法进行诊断(1类推荐)。

2．在条件缺乏的地区建议采用常规免疫组织化学法进行ALK阳性非小细胞肺癌患者的初筛，筛查ALK阳性或疑似阳性的患者必须接受FISH、Ventana IHC或者RT-PCR技术中任意一种技术确诊(2A类推荐)。

3．对于ALK常规免疫组织化学，建议采用国内病理专家达成共识的规范化操作和判读标准进行操作。推荐使用经过证实，具有高灵敏度和特异度的抗体。

专家组推荐：

1．使用经过CFDA批准的试剂盒进行ROS1融合基因的检测(1类推荐)。此外，临床研究使用的经过验证的技术如FISH也可以作为补充诊断ROS1融合基因(2A类推荐)。

2．对于晚期非小细胞肺癌小活检样本，推荐ROS1和ALK、EGFR同时检测(2A类推荐)，推荐使用经过认证的多靶点检测技术，同时检测ALK、EGFR和ROS1。

3．对于不能同时检测的患者，可以先使用ROS1的免疫组织化学检测，ROS1检测结果阳性的患者，进一步进行FISH或RT-PCR确诊。对于ROS1免疫组织化学，研究证实D4D6抗体具有较高的灵敏度，但检测结果仍具有较高的假阳性。因此，对于免疫组织化学检测ROS1阳性的标本必须采用FISH或RT-PCR方法进行确诊。

EGFR：表皮生长因子受体；ALK：间变性淋巴瘤激酶；RT-PCR：即时荧光定量聚合酶链反应；ARMS：扩增阻滞突变系统；IHC：免疫组织化学；FISH：荧光原位杂交

▲图1 中国ALK、ROS1阳性非小细胞肺癌患者的诊断流程图

专家组推荐：

1．对于初诊为ROS1阳性晚期非小细胞肺癌患者，应一线使用克唑替尼治疗(1类推荐)。

2．确诊ROS1前由于各种原因接受了化疗的患者，在确诊ROS1阳性后可中断化疗或在化疗完成后接受克唑替尼治疗(2A类推荐)。

3．对于ROS1阳性患者，克唑替尼治疗出现疾病进展的后续治疗，目前缺乏相应的循证医学证据，可以根据具体治疗情况，采取后续化疗方案进行治疗。